دیسک آنتی بیوگرام ONPG پادتن طب

دیسک تشخیصی ONPG (ارتونایتروفنیل-بتا-دی-گالاکتوپیرانوزید) پادتن طب، از معرف‌های کلیدی در بخش میکروب‌شناسی بالینی جهت شناسایی بیوشیمیایی و تفکیک باکتری‌های خانواده انتروباکتریاسه‌ و گونه‌های مختلف باسیل‌های گرم‌منفی است. تخمیر قند لاکتوز به دو آنزیم نیازمند است: «پرمه‌آز» (جهت انتقال لاکتوز به داخل سلول) و «بتا-گالاکتوزیداز» (جهت هیدرولیز لاکتوز به گلوکز و گالاکتوز). باکتری‌های تخمیرکننده دیرهنگام (Late Lactose Fermenters) فاقد پرمه‌آز بوده اما آنزیم بتا-گالاکتوزیداز را دارند. سوبسترای ONPG به راحتی بدون نیاز به پرمه‌آز وارد باکتری شده و در صورت وجود بتا-گالاکتوزیداز، به ماده زردرنگ ارتونایتروفنول هیدرولیز می‌شود.

ویژگی‌ها و مزایای دیسک ONPG پادتن طب

استفاده از دیسک‌های تشخیصی آماده به جای تهیه لوله‌های آبگوشت ONPG، فرآیند شناسایی را به شدت تسریع می‌کند:

• سنجش بسیار سریع، دقیق و با حساسیت بالا نسبت به کشت‌های طولانی‌مدت بر روی محیط‌های قندی
• بارگذاری یکنواخت سوبسترای استاندارد و بدون ناخالصی با کمترین احتمال نتایج مثبت یا منفی کاذب
• ایجاد تغییر رنگ زرد شفاف و کاملاً ملموس در نمونه‌های مثبت جهت قرائت آسان و بدون ابهام
• کاهش زمان شناسایی ایزوله‌های بالینی از ۴۸ ساعت به کمتر از ۲ تا ۴ ساعت
• بسته‌بندی ایمن و نفوذناپذیر در برابر رطوبت محیط جهت مهار هیدرولیز خودبه‌خودی سوبسترا

کاربردهای تشخیصی در میکروب‌شناسی بالینی

تست سریع دیسک ONPG در جریان شناسایی پاتوژن‌های گوارشی و روده‌ای اهمیت تشخیصی حیاتی دارد:

• افتراق شیگلا از اشرشیا کلی غیرفعال: بسیاری از سویه‌های Shigella sonnei دارای بتا-گالاکتوزیداز بوده و تست ONPG آن‌ها مثبت می‌شود (برخلاف سایر گونه‌های شیگلا).
• تفکیک سالمونلا از باکتری‌های مشابه: باکتری Salmonella enterica معمولاً در تست ONPG منفی است، در حالی که ارگانیسم‌های مشابه نظیر Citrobacter freundii یا Arizona اغلب مثبت هستند.
• شناسایی باسیل‌های گرم‌منفی غیرتخمیرکننده: کمک به شناسایی افتراقی گونه‌های نایسریا، سودوموناس و موروکسلا بر پایه فعالیت گالاکتوزیدازی.

روش انجام آزمایش و تفسیر نتایج

1. مقدار ۰.۲ الی ۰.۵ میلی‌لیتر سرم فیزیولوژی (سرم نمکی ۰.۸۵٪) یا آب مقطر استریل را درون یک لوله کوچک همولیز بریزید.
2. یک سوسپانسیون غلیظ و سنگین از کلنی خالص و تازه‌ی رشد کرده (ترجیحاً از محیط‌های دارای لاکتوز مثل TSI یا مک‌کانکی) در لوله تهیه کنید.
3. یک عدد دیسک ONPG پادتن طب را با پنس استریل داخل لوله بیندازید.
4. لوله را در انکوباتور ۳۵ تا ۳۷ درجه سانتی‌گراد انکوبه نمایید و تغییر رنگ را پس از ۳۰ دقیقه، ۱ ساعت و حداکثر ۴ ساعت بررسی کنید:
   • نتیجه مثبت (+): ایجاد رنگ زرد مشخص درون لوله (حضور آنزیم بتا-گالاکتوزیداز).
   • نتیجه منفی (-): مایع لوله بی‌رنگ باقی می‌ماند (عدم وجود آنزیم بتا-گالاکتوزیداز).

کنترل کیفی (QC) و نگهداری

برای پایش صحت عملکرد دیسک‌ها توصیه می‌شود از ارگانیسم‌های مرجع زیر استفاده شود:

• کنترل مثبت: Escherichia coli ATCC 25922 (ایجاد رنگ زرد)
• کنترل منفی: Proteus mirabilis ATCC 12453 یا Salmonella typhimurium (مایع بی‌رنگ)

دیسک‌ها باید در دمای ۲ الی ۸ درجه سانتی‌گراد (یا ۲۰- درجه جهت نگهداری طولانی‌مدت) در محیط کاملاً خشک نگهداری شوند. از مصرف دیسک‌هایی که به دلیل تماس با رطوبت تغییر رنگ داده و زرد شده‌اند، خودداری فرمایید.

خرید دیسک ONPG پادتن طب از تکسان طب آزما

تکسان طب آزما مرجع معتبر توزیع کیت‌ها، دیسک‌های آنتی‌بیوگرام و دیسک‌های تشخیصی باکتری‌شناسی در ایران، اصالت و شرایط نگهداری زنجیره سرد دیسک‌های پادتن طب را تضمین می‌کند. برای خرید عمده و استعلام قیمت همکار با کارشناسان ما تماس بگیرید.